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賽默飛2720PCR儀的平臺效應是什么?

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    賽默飛2720PCR儀是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的特點,是能將微量的DNA大幅增加。
 
    賽默飛2720PCR儀可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。不同的DNA片段其適合的退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。
 
    梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣既節約時間,也節約成本。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。梯度PCR儀多應用于科研、教學機構等。
 
    其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統,得出量化的實時結果輸出。
 
    PCR擴增過程后期會出現的產物的積累按減弱的指數速率增長的現象。原因:底物和引物的濃度已經降低,dNTP和DNA聚合酶的穩定性或活性降低,產生的焦磷酸會出現末端產物抑制作用,非特異性產物或引物的二聚體出現非特異性競爭作用,擴增產物自身復性,高濃度擴增產物變性不干凈。
 
    PCR反應體系的配置方式有時也會影響反應的正常進行。常規方法與其它酶學反應一樣,再加入DNA聚合酶。早期的PCR儀沒有帶加熱的蓋子,要求在反應液上覆蓋一層礦物油,防止水分蒸發。

TEL:18016231680

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